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克隆感受態_熱激

双色球基本走势图机选:DB3.1

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双色球蓝球走势图表 www.axdbte.com.cn DB3.1 Chemically Competent Cell 產品說明書 




產品規格(CAT#: DL1040)

DB3.1:                                                      100μl/支

pUC19 (control vector,10pg/μl):                   10μl

保存條件(保質期):                            -80℃(6個月) 


基因型

F- gyrA462 endA1 glnV44 Δ(sr1-recA) mcrB mrr hsdS20(rB-, mB-) ara14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20 (SmR) xyl5 Δleu mtl1




產品說明

DB3.1大腸桿菌菌株基因組中含有gyrA462基因,賦予其對ccdB毒性基因的抗性,特別適用于構建或擴繁含有ccdB基因的質粒載體 (例GATEWAY System vector),此菌株具有鏈霉素抗性。DB3.1感受態細胞經特殊工藝制作,pUC19檢測轉化效率>108 cfu/μg DNA。


操作方法

1. DB3.1感受態細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質?;蛄硬錚┎⒂檬植Υ駿P管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。

3. 向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養基(2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。

4. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應

抗生素的2YT或LB培養基上。

5. 將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。


注意事項

1. 感受態細胞最好在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。

2. 混入目的DNA時應輕柔操作。

3. 轉化高濃度的質?;蚋咝實牧硬錕上嚶跎僮鈧沼糜諭堪宓木?。





說明書下載

DB3.1 Chemically Competent Cell 產品說明書



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