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克隆感受態_熱激

双色球基本走势图分析:XL1-Blue

文字:[大][中][小] 2015-8-26    瀏覽次數:3461    

双色球蓝球走势图表 www.axdbte.com.cn XL1-Blue Chemically Competent Cell 產品說明書 




產品規格 (CAT#: DL1030)

XL1-Blue:                                                     100μl/支

pUC19 (control vector,10pg/μl):                     10μl

保存條件(保質期):                         -80℃(6個月)


基因型

recA1 endA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 supE44 (rk-,mk+), relA1 lac [F' proAB lacIqZ?M15: Tn10 (TetR)]



產品說明

XL1-Blue菌株能保證高拷貝質粒穩定復制,recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩定和高純度質粒DNA的提取。hsdR17突變導致EcoK核酸內切酶系統缺失,增強了外源DNA的穩定性和提取質量。 lacIqZΔM15 的存在使XL1-Blue菌株可用于藍、白斑篩選。此菌株具有四環素抗性。XL1-Blue感受態細胞經特殊工藝制作,pUC19質粒檢測轉化效率>109cfu/μg DNA。


操作方法

1. XL1-Blue感受態細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質?;蛄硬? 并用手撥打EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。

3. 向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養基 (2YTLB),混勻后37℃,200rpm復蘇60分鐘。

4. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YTLB培養基上。

5. 將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。 


注意事項

1. 感受態細胞最好在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。

2. 混入質?;蛄硬鍤庇η崛岵僮?。

3. 轉化高濃度的質?;蚋咝實牧硬錕上嚶跎僮鈧沼糜諭堪宓木?。





說明書下載

XL1-Blue Chemically Competent Cell 產品說明書



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