今天是2020年4月3日 星期五,歡迎光臨本站 上海唯地生物技術有限公司 網址:双色球蓝球走势图表

克隆感受態_熱激

浙江双色球基本走势图:JM110

文字:[大][中][小] 2015-8-26    瀏覽次數:3350    

双色球蓝球走势图表 www.axdbte.com.cn JM110 Chemically Competent Cell 產品說明書




產品規格(CAT#: DL1025

JM110:                                                     100μl/支

pUC19 (control vector,10pg/μl):                   10μl

保存條件(保質期):                            -80℃(6個月) 



基因型

rpsL (StrR) thr leu thi-1 lacY galK galT ara tonA tsx dam dcm supE44 Δ(lac-proAB) /F′ [traD36 proAB lacIqlacZΔM15] 



產品說明

JM110菌株具有硫酸鏈霉素抗性(StrR);是甲基化基因dam、dcm缺失的菌株,提取得到的質粒DNA,可被對dam、dcm甲基化敏感的內切酶切割;lacIqlacZΔM15的存在使JM110可以進行藍白斑篩選,但轉化效率不高,一般不用于質粒構建,只適用于質粒轉化。JM110感受態細胞經特殊工藝制作,pUC19 質粒檢測轉化效率約107 cfu/μg DNA。


操作方法

1. JM110感受態細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質?;蛄硬錚┎⒂檬植Υ駿P管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。

2. 42水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。

3.向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。

4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。

5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。



注意事項

1. 感受態細胞最好在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。

2. 混入質粒時應輕柔操作。

3. 轉化高濃度的質??上嚶跎僮鈧沼糜諭堪宓木?。





說明書下載

JM110 Chemically Competent Cell 產品說明書



返回上一步
打印此頁
[向上]
在線客服

双色球蓝球走势图表

技術QQ

咨詢電話:
021-34790199

請掃描二維碼
打開手機站